Антибиотики и химиотерапевтические препараты. И. Ф. Каримов

является биоавтографический метод. С этой целью высушенные в вытяжном шкафу полоски бумаги накладываются на агаровую пластинку, предварительно засеянную культурой тест-организма, чувствительной к изучаемому антибиотику. Кюветы с полосками бумаги помещают в термостат на 18-20 ч при температуре, оптимальной для роста тест-организма. По зонам отсутствия роста тест-микроба, образующимся вокруг тех мест на хроматограмме, где находится пятно антибиотика, судят, во-первых, об однородности антибиотика; во-вторых, сравнивают полученные хроматограммы с хроматограммами известных антибиотических веществ (рисунок 1).

      а – стандартный раствор пенициллина G; б, в – хроматограмма производственных образцов 1950 г. За пятном пенициллина G (вверху) следуют пенициллин F, дигидро F и самая нижняя зона – пенициллин К; г – хроматограмма конечного препарата калиевой соли (1950).

      Рисунок 1 – Использование метода бумажной хроматографии для разделения пенициллинов, образуемых штаммом Q-176 на кукурузной среде с лактозой

       Химические методы обнаружения антибиотиков на хроматограммах основаны на реакциях, в результате которых образуются соединения, выявляемые по соответствующей окраске или обесцвечиванию реактива в месте расположения пятна антибиотика.

       Физические методы обнаружения антибиотиков включают в себя способы, связанные:

      а) с выявлением люминесценции антибиотического пятна в ультрафиолетовом (УФ) возбуждении;

      б) с поглощением УФ излучения;

      в) с определением радиоактивной метки антибиотика.

      Для целей бумажной хроматографии антибиотиков с успехом можно использовать и круговые хроматограммы.

      Важное значение при оценке результатов хроматографии имеет положение пятен исследуемых веществ, характеризуемое коэффициентом R_f. Коэффициент R_f определяется отношением расстояния, которое проходит пятно изучаемого вещества от линии старта за определенное время, к расстоянию фронта растворителя, прошедшего от линии старта:

      где Sp – расстояние, пройденное пятном изучаемого вещества;

      Sf – расстояние фронта растворителя, пройденное от старта.

      Воспроизводимость значении R_f зависит от постоянства следующих факторов: качества бумаги, температуры, степени чистоты растворителей, состава газов атмосферы, в которую помещена бумага, однотипности процедур и аппаратуры.

      При использовании метода хроматографии па бумаге для идентификации антибиотиков было показано, что значение R_f зависит также и от системы растворителей, от степени очистки изучаемого антибиотика и от состава культуральной жидкости.

      По спектру значении R_f или, как его иногда называют, по хроматографическому спектру можно четко различать группы химически родственных антибиотиков и до некоторой степени отличать также антибиотики внутри групп.

      Существенное